丁酸氯维地平原料药残留溶剂的测定

袁慧雅，徐恩宇，高利娜，刘俊亭^*

（中国医科大学法医毒物分析教研室，沈阳 110122）

丁酸氯维地平（Clevidipine Butyrate）的化学名为4-(2,3-二氯苯基)-1,4-二氢-2,6-二甲基-3,5-吡啶二甲酸甲基(1-丁酰氧基)甲酯，为白色结晶粉末，是一种新型超短效二氢吡啶类钙离子拮抗剂^[1]。易溶于甲醇、乙醇、乙醚等极性有机溶剂，难溶于水。丁酸氯维地平注射乳剂于2008年在美国上市^[2]，国内药品尚在研发阶段，其残留溶剂测定方法未见文献报道。本实验建立了顶空气相色谱法测定其合成工艺中使用的乙醇、异丙醇、乙酸乙酯等有机溶剂残留量。

1　仪器与试剂

Agilent 7890A气相色谱仪（美国Agilent公司），色谱柱为DB-624（30m×530μm×3μm，Agilent）石英毛细管柱；BT 25S分析天平（赛多利斯公司）。

所用试剂均为色谱纯，其中无水乙醇、异丙醇购自天津康科德化学试剂厂；乙酸乙酯购自山东禹王实业有限公司化工分公司；丁酸氯维地平原料药（某药厂提供，批号：151101）。

2　方法和结果

2.1　溶液配制

2.1.1　对照品储备液

精密称取乙醇2.5g、异丙醇2.5g、乙酸乙酯2.5g，置同一50ml量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。

2.1.2　对照品溶液

精密量取对照品储备液1ml，置50ml量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.1.3　供试品溶液

取丁酸氯维地平原料药0.4g，精密称定，置20ml顶空瓶中，加入2ml二甲基亚砜溶解，压盖密封，作为供试品溶液。

2.2　色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：DB-624（30m×530μm×3μm，Agilent）石英毛细管柱；检测器：氢火焰离子化检测器（FID）；柱温：程序升温，初始温度50℃（保持10min），以40℃/min速率升至200℃（保持5min）；进样口温度：200℃；检测器温度：250℃；载气：氮气，流速为2ml/min；顶空进样量：1ml；分流比：5 : 1；顶空平衡温度：100℃；顶空平衡时间：30min。

按上述色谱条件，精密量取对照品溶液2ml，置20ml顶空瓶中，进样分析记录色谱图，乙醇、异丙醇、乙酸乙酯之间分离度应不小于1.5，理论板数不低于5000。

2.3　专属性试验

精密量取空白二甲基亚砜溶剂、对照品溶液、供试品溶液各2ml，分别置20ml顶空瓶中，按残留溶剂检查色谱条件进样，记录色谱图1～图3。结果表明各成分之间分离度均符合要求，丁酸氯维地平及空白溶剂对残留溶剂的检查无干扰，本方法专属性良好。

2.4　检测限和定量限

将对照品溶液用二甲基亚砜逐级稀释，分别顶空进样，记录色谱图。按信噪比为10计算，乙醇、异丙醇、乙酸乙酯的定量限分别为0.80μg/ml、2.00μg/ml、1.20μg/ml。按信噪比为3计算，3种溶剂检测限分别为0.25μg/ml、0.65μg/ml、0.40μg/ml。

2.5　线性和范围

分别精密量取对照品储备液0.5ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml和1.5ml于50ml量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，即得对照品系列标准溶液。分别精密量取上述系列标准溶液2ml，按残留溶剂检查色谱条件进样。以质量浓度（c，µg/ml）为横坐标，以峰面积（A）为纵坐标进行线性回归，结果见表1，各溶剂在相应的浓度范围内线性关系均良好。

2.6　回收率试验

取丁酸氯维地平原料药（批号：151101）0.4g，精密称定，置20ml顶空瓶中，分别精密加入对照品储备液配制成浓度为800μg/ml、1000μg/ml、1200μg/ml的溶液，每个浓度平行制备3份，压盖密封，按残留溶剂检查色谱条件进样分析，乙醇、异丙醇、乙酸乙酯的平均回收率分别为97.1%、97.0%、86.8%。

3　讨论

3.1　溶剂的选择

原料药残留溶剂测定常采用N, N-二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亚砜（DMSO）等“万能溶剂”，因其对于不同种类的残留溶剂均有良好的溶解性。因DMF在药物合成过程中有所使用，故本实验采用二甲基亚砜作为溶剂避免实验误差。

3.2　有机溶剂种类和限度的确定

待测有机溶剂种类的确定主要根据药物合成工艺和《中国药典》2015年版Ⅳ部通则0861的限度要求。药典规定乙醇、异丙醇、乙酸乙酯均不得过0.5%，故该原料药应符合以上标准。

参考文献

[1] Li L, Bi K S, Hu X. Chinese J New Drugs, 2010, 19(12): 1003-1006.

^*通信作者：刘俊亭，男，教授，博士生导师，研究方向法医毒物分析，E-mail: liujunting8@163.com