诊断

1.皮疹、酸中毒及发育落后临床表现，新生儿筛查的患者可无临床表现；

2.常规实验室检测在急性期出现酸中毒，全血细胞减少，电解质紊乱；

3.血酰基肉碱谱检测提示血3-羟基异戊酰肉碱（C5OH）增高，可伴有丙酰肉碱（C3）或C3与乙酰肉碱（C2）比值增高；

4.尿有机酸分析丙酮酸、3-羟基丙酸、3-羟基丁酸、3-羟基异戊酸、3-甲基巴豆酰甘氨酸增高；

5.生物素酶活性检测提示BTDD患者其生物素酶活性低于正常人10%，严重者酶活性低于正常人1%，部分缺乏型患者酶活性为正常人10%～ 30%；

6.基因检测：BTD基因检测到突变。

需要与血C5OH增高的其他疾病鉴别，包括全羧化酶合成酶，3-甲基巴豆酰辅酶A 羧化酶缺乏症，3-甲基戊烯二酸尿症，3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶A裂解酶缺乏症，β酮硫解酶缺乏症等。