2.4　实验技术

2.4.1　样品的制备

紫外-可见吸收光谱的测定通常在溶液中进行，固体样品需处理成溶液。光谱分析法对溶液的要求：良好的溶解能力，挥发性小，毒性低等。在溶剂的选择上，首先，要考虑溶剂在紫外区产生一定的吸收而对测定结果的影响；其次，溶剂的极性不同不仅影响谱带的位置（发生红移或蓝移）或谱带强度，而且会影响谱带精细结构的出现或消失。

2.4.2　测定条件的选择

2.4.2.1　波长的选择

为了使测定结果有较高的灵敏度和准确度，通常选择最大吸收波长作为分析波长。依据吸收曲线确定最大吸收波长，在最大吸收波长处进行定量分析，其测定的灵敏度较高，吸光度随波长的变化较小，可以获得较好的测量精度。

2.4.2.2　狭缝宽度的选择

考虑到最小干扰的原则，定性分析常采用最小狭缝宽度。定量分析时，如果狭缝宽度太小则入射光强度太弱会引起信噪比降低，因此狭缝宽度应适当增大。

2.4.2.3　吸光度范围

吸光度在0.2～0.7时，测量的准确度较高。因此应该调整溶液吸光度大小，控制在此范围内。常用的方法是：①含量高时少取样或取稀液，而含量低时可多取样或萃取富集；②若溶液已显色，则可通过改变吸收池的厚度调吸光度大小；③选择合适的参比溶液。

2.4.2.4　有色化合物的形成

在实际测定中，样品中的被测组分不产生吸收，则需要加入一种试剂（显色剂），显色剂与被测组分作用形成有色化合物或形成含有生色团的化合物。该显色剂应具有选择性好，灵敏度高，所形成的有色化合物的组成恒定，化学性质稳定等特点。常用的显色剂多为含有生色团的有机化合物。

2.4.3　参比溶液的选择

调节仪器的工作零点常采用参比溶液。测定时，让光通过参比溶液，调节零点，使A=0，T=100%，然后测试待测溶液。

选择适当的参比溶液，可以消除某些干扰因素。参比溶液选择的原则是使所测A值能真正反映待测样品的浓度。参比溶液选择的具体方法：

①当试液、显色剂和条件试剂（如pH缓冲溶液、掩蔽剂等）均无色时，用蒸馏水作参比溶液。

②若显色剂、条件试剂无色，而试液中其他共存离子有色，则用不加显色剂和条件试剂的试液作参比溶液，可消除共存离子的颜色干扰。

③若显色剂、条件试剂及被测试样中的共存离子在测定波长下均有吸收，可取一份试液加入掩蔽剂，将被测组分掩蔽起来，再加入显色剂、条件试剂，将此混合液作参比溶液，以消除干扰。

此外，为得到准确的测定结果，对吸收池厚度、透射率、仪器波长、读数刻度等也应进行校正。