1.产金属酶的检测：任重而道远

【案例经过】

75岁女性患者，以头晕待查入院，既往2型糖尿病、慢性胆囊炎、脑梗死史。入院第7天，患者出现发热、寒战伴上腹部疼痛。B超结果显示：胆道结石合并胆囊感染，同时行血培养检查。血培养需氧瓶和厌氧瓶均检出大肠埃希菌，药敏结果提示除了阿米卡星，磺胺甲唑敏感外，其他药物（包括哌拉西林、头孢他啶、环丙沙星、头孢吡肟、庆大霉素、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、美罗培南）耐药。于是进行金属酶表型试验，纸片协同法阳性（图1-1D，E），双纸片增强试验阳性（图1-1，直径≥7mm）。

【形态学检验图谱】

图1-1　金属酶检测试验

A：空白纸片+10μl EDTA溶液（0.1mmol/L），测得抑菌圈直径为6mm；B：IPM纸片抑菌圈直径为10mm；C：IPM+10μl EDTA溶液（0.1mmol/L），测得抑菌圈直径为20mm；D：空白纸片+IPM纸片（纸片间距为5mm）；E：空白纸片+IPM纸片（纸片间距为10mm）

【分析与体会】

多重耐药的大肠埃希菌对于临床而言比较棘手，尤其是耐碳青霉烯类菌株的出现，往往无药可用。然而，提供耐药表型或基因型有助于临床治疗和防控。

金属酶是碳青霉烯酶的一种，可以通过PCR法、E-test法、EDTA增强法等确定。由于耐药基因检测、E-test法需要昂贵的仪器、试剂、相应专业技术，一些实验室无法开展。EDTA（乙二胺四乙酸盐）可以作为金属酶抑制剂，通过纸片协同试验和双纸片增强试验进行金属酶表型确证，而且其配制方法简单，操作简便，值得应用。但值得注意的是，金属酶检测所用底物、抑制剂等不同，结果存在差异［1］。比如在本案例中，选择0.1mmol/L EDTA溶液，在纸片协同试验中，很显然纸片间距为10mm协同现象更典型。由于这样的菌株很少，而且临床和实验室标准协会（CLSI）至今未给出金属酶表型检测方法，一些底物、抑制剂的选择仍需不断地实验与改进。

【箴言】

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌有必要检测其是否产金属酶。

参考文献

［1］Picão RC，Andrade SS，Nicoletti AG，et al.Metallo-beta-lactamase detection：com-parative evaluation of double-disk synergy versus combined disk tests for IMP-，GIM-，SIM-，SPM-，or VIM-producing isolates.J Clin Microbiol，2008，46（6）：2028-2037.

（刘春林，邮箱：545997273@qq.com）